Hur man förbereder växthormonlösningar för vävnadskultur

Introduktion

Växttillväxtregulatorer som syntetiseras av växterna är nödvändiga för deras tillväxt och utveckling. Men, att inducera samma svar i ett labb under artificiella förhållanden, det kräver tillsats av exogena växttillväxtregulatorer till mediet.

I dag, flera naturliga och syntetiska växttillväxtregulatorer (PGR), växthormoner, eller fytohormoner är tillgängliga för användning i vävnadsodlingsexperiment. Men hur man förbereder en PGRs lösning är det vanligaste problemet eller förvirringen som våra kulturister står inför!

Så, i den här artikeln, vi har täckt hur man förbereder stamlösningen av växttillväxtregulatorer och stamlösningen av NaOH (lösningsmedel) som krävs för att lösa upp hormonet i pulverform.

Hur förbereder man en lagerlösning av PGR?

För att förbereda stamlösningen för alla växttillväxtregulatorer följer du stegen nedan:

• Ta 50 ml falkrör för varje hormon som du är villig att förbereda beståndet för.
• Märk varje rör ordentligt med hormonets namn.
• För att förbereda 1mg/L arbetslösning för växttillväxthormon, förbered 1g/L lösning med vatten.
• I videon, vi mäter upp 0,05 gram (50 mg) pulverform av hormonet för att framställa en 50 ml stamlösning.
• Du kan använda en kopp och spatel för att mäta varje växttillväxtregulator. Men, du bör byta koppen och rengöra eller byta spateln varje gång du mäter en annan växttillväxtregulator för att undvika korskontaminering av dina stamlösningar.

Obs:Från en PCTs 100-gramsflaska med växttillväxtregulatorer, du kan förbereda 100 liter stamlösning. Dock, du behöver bara 1 ml stamlösning för att göra 1 liter media. Så, totalt kan du förbereda 100K liter media per flaska.

• Nästa steg är att lösa upp tillväxtregulatorns pulverform. Det löser sig inte direkt i vatten, så du behöver ett lösningsmedel.
• Använd NaOH som lösningsmedel för att lösa upp tillväxtregulatorns pulverform.
• Använd en mikropipett mäta 1 ml NaOH och tillsätt den till 50 ml falkröret som innehåller den pulveriserade tillväxtregulatorn. Blanda det ordentligt och byt pipettspetsar innan du flyttar för att blanda nästa tillväxtregulatorer för att undvika korskontaminering mellan hormoner (om du förbereder en växthormonstamlösning av mer än ett hormon).

Du kan också använda den lilla omröraren eller skaka röret eller flaskan för att lösa upp det pulveriserade hormonet i lösningsmedlet.

Obs:Proceduren för att framställa 1M NaOH ges nedan. Så, ta 1 ml NaOH från den beredda 1M lösningen för att lösa upp växttillväxtregulatorer.

• Tillsätt sedan 49 ml (eftersom du redan har tillsatt 1 ml NaOH för att lösa upp det pulveriserade hormonet) destillerat vatten med hjälp av en pipett för att göra 50 ml av stamlösningen av hormonet.
• Sedan, det är dags att sterilisera stamlösningen eftersom de inte är sterila. Du bör veta om ditt hormon om det är värmebeständigt eller inte.
• Om hormonet inte är värmebeständigt, du måste filtrera lösningen med spruta efter att mediet har svalnat till minst 60 grader celsius och om det är värmebeständigt kan du autoklavera lösningen.
• Då är din stamlösning redo att användas för ditt experiment. Du kan späda den för att få den till önskad koncentration.

Hur förbereder man 1M NaOH-lösning?

Natriumhydroxid (NaOH) används för att öka pH i odlingsmediet eller lösa upp den pulveriserade formen av tillväxtregulator.

• För att förbereda NaOH-stamlösningen behöver du NaOH-pellets, en spatel, Erlenmeyer flaska.
• Tillsätt 100 ml destillerat vatten till Erlenmeyerkolven med hjälp av pipetten.
• För att göra en molär lösning av NaOH behöver du formeln:

Molaritet =nej. mol löst ämne / 1 liter

Och, en mol natriumhydroxid =40 gram

Så, om du vill förbereda 1M NaOH-lösning, du behöver 40 gram NaOH löst i 1L av lösningen.

Men, här förbereder vi bara 100 ml av stamlösningen, så för det, du behöver bara 4 gram NaOH löst i 100 ml vatten.

• Mät 4 gram NaOH med en spatel på en vågmaskin.
• Tillsätt de uppmätta NaOH-pellets i vatten och använd en omrörd lösning för att göra det till en homogen lösning.
• Efter att pelletsen har lösts upp, överför lösningen till förvaringsflaskan.
• Din 1 molära NaOH-lösning är redo att användas för dina experiment.

Köp PGR av bästa kvalitet från PCT nu!

Växttillväxtregulatorer är en viktig del av ditt recept för vävnadsodlingsmedia. De underlättar tillväxt och utveckling av växter.

På Plant Cell Technology, du får de bästa växttillväxtregulatorerna av bästa kvalitet inklusive metatopolin, gibberellinsyra, IAA, IBA, kinetin, och BAP.

Och inte bara detta kan du också köpa all annan vävnadsodlingsutrustning och kemikalier till ett mycket rimligt pris.

Så, varför vänta!

Gå framåt i dina vävnadsodlingsexperiment med högkvalitativa PCT-produkter nu!