​Hur man vävnadskultur Alocasia (elefantens öra)

Introduktion

Bladberlocken, mönstret av bladvariation och textur, och dess tolerans mot begränsat solljus gör Alocasias till en av de mest populära växterna bland trädgårdsmästare och växtsamlare.

Alocasia omfattar cirka 100 arter och är ett morfologiskt mångsidigt släkte i familjen Arecaceae. Medlemmarna används flitigt för flera ändamål. Dess löv, rötter, och stam används för ätbara ändamål på vissa ställen, och växten Giant Taro har många medicinska egenskaper inklusive antidiarré, svampdödande, och antiinflammatoriska egenskaper.

Växtens medicinska egenskaper och skönhet gör den mycket eftertraktad bland människor. Den skyhöga efterfrågan på dessa växter i kommersiella utrymmen har drivit forskare att komma på ett bättre alternativ för att möta marknadens efterfrågan. Och, vävnadsodlingsverktyg har visat sig vara utmärkta tekniker för att uppfylla alla ovan nämnda syften.

Den här artikeln presenterar en beskrivning av Alocasia släkten och dess medlemmar och vidare, det tar dig till vävnadskulturen av denna växt och dess procedur.

Om Plant

Alocasia är ett släkte med knölartade fleråriga blommande växtarter med breda blad och rhizomer. Plantorna blir vanligtvis 2-6 cm höga.

Växternas blad är långskalade, pilspetsformade till hjärtformade som är dekorerade och färgglatt utsmyckade i olika storlekar, från 8" till 36" lång, beroende på art. Växterna kallas vanligtvis för elefantöron på grund av att deras blad liknar stora elefantöron.

De är infödda i tropiska regnskogar, sekundära vegetationsplatser, och längs bäckar eller sumpiga platser från Indien, Sydöstra Asien, och södra Kina genom södra Stillahavsöarna (särskilt Filippinerna, Caroline Islands, och Indonesien) till östra Australien.

Alocasia har varit modehöjden för trädgårdsmästare, kulturister, och växtsamlare i över 150 år. Dessa växter samlas in och säljs i stor skala för att uppfylla kommersiell skala.

Existensen av flera arter av släktena har hotats på grund av kontinuerlig insamling och förstörelse av livsmiljöer. Trycket för att skydda dessa växter kan lättas genom att använda mikroförökningstekniker in vitro.

Vävnadskultur av Alocasia

Vävnadskultur har varit ett viktigt biotekniskt verktyg i växtlaboratorier på grund av dess stora potential för förökning av högvärdiga medicinalväxter, tillverkning av högkvalitativa naturprodukter, och snabb och massproduktion av växter.

Det är det bästa alternativet för produktion av medicinskt viktiga växtmetaboliter, snabb förökning av hotade eller sällsynta arter, produktion av sjukdomsfria växter, och växt-genom-transformation.

Många företag har använt skottodlingstekniken för att producera många sjukdomsfria kloner av aroider sedan 1974 (Hartman).

Här, ett förfarande för vävnadsodling av Alocasia longiloba med hjälp av frön har behandlats, som är hämtat från studien av Abdulhafiz, F., Mohammed, A., Kajat, F., Zakaria, S., Hamzah, Z., Reddy Pamuru, R., Hamzah Z., Reduan, M. F. H. (2020). Mikroförökning av Alocasia longiloba Miq och jämförande antioxidantegenskaper hos etanolextrakt från den åkerodlade växten, In vitro förökad och in vitro-härledd kallus. Växter, 9(7), 816. doi:10.3390/plants9070816

Procedur

• Växtmaterial och fröberedning:
• Samla frukterna av A.longoliba och tvätta dem under rinnande vatten följt av sköljning i sterilt destillerat vatten för att ta bort dammet helt. Sedan, Separera fröna försiktigt för hand och torka dem i rumstemperatur i två veckor.
• Seed Viabilitetstest:

• Sug in några (100 eller fler) frön i sterilt destillerat vatten i 18 timmar vid 25 ± 2 °C för att mjuka upp tegumentet och aktivera enzymsystemen.
• Sänk ner fröna i 1% tetrazoliumlösning (pH 7,0 ± 2) och inkubera vid 45 °C i 6 timmar i mörkt tillstånd.
• I slutet av inkubationsperioden, tvätta fröna med sterilt destillerat vatten och observera under ett mikroskop för förändringen i färgen. Sedan, beräkna procentandelen av livsduglighet som antalet färgade embryon/totalt antal. av embryon multiplicerat med 100.

• Sterilisering av fröyta:

• Tvätta de torkade fröna av A. longiloba under rinnande kranvatten i 30 min.
• Ytsterilisera fröna med en koncentration av 40% Clorox (natriumhypoklorit 5,25%) med några droppar tween-20.
• Skaka fröna på en orbital shaker vid 80 rpm i 20 min.
• Tvätta de steriliserade fröna med sterilt destillerat vatten för att ta bort ett spår av Clorox och torka sedan torrt på den steriliserade Whatman-filterstudien (90 mm).

• Förgroningsbehandling:

För att bryta fröets dvala och maximera fröns groning, följ proceduren för att behandla frön:

• Skarpa fröna med 30 % svavelsyra (H2SO4) i 15 minuter och skölj sedan i destillerat vatten i 10 minuter för att ta bort spåret av sur lösning.
• Ytsterilisera dem med 40% Clorox i 20 minuter och tvätta sedan med sterilt destillerat vatten tre gånger varje gång i 1 minut.
• Odla fröna på ett medium som består av MS-medium, kompletterat med 30 g L−1 sackaros, 2,78 g L−1 Gelrite utan växttillväxtregulator.
• Justera pH till 5,7 ± 0,2 innan agar tillsätts och autoklaveras sedan vid 121 °C vid 103 kPa i 20 minuter.
• Inkubera kulturerna vid 25 ± 2 °C med en 16-timmars fotoperiod som tillhandahålls av kallt vitt fluorescerande ljus.

• In vitro skottinduktion och multiplikation:

• Använd de fyra veckor gamla odlade in vitro fröna i detta skede.
• Ta bort hjärtbladen, hypokotyl, och roten försiktigt.
• Inokulera cirka 2–3 cm skottspets i MS-medium kompletterat med cytokinin 6-bensylaminopurin (BAP), vid 3 mg L−1.

• För kallusinduktion:

• Behandla fröna med 30% svavelsyra i 15 minuter följt av ytsterilisering med 40% Clorox i 20 minuter.
• Tvätta sedan explantaten med sterilt destillerat vatten för att ta bort spåret av Clorox.
• Inokulera de desinficerade fröna aseptiskt i en burk innehållande cirka 25 mL medium (MS-medium kompletterat med 3-mg L−1 IAA) för kallusinduktion.
• Inkubera kulturerna vid 25 ± 2 °C under kallt fluorescerande ljus med en 16/8 timmars ljus/mörkercykel.

• För in vitro rotning:

• Odla de isolerade skotten (2–3 cm) från flera skottkulturer i glasburkar innehållande 20 mL MS-medium kompletterat med indol-3-ättiksyra vid 0,5 mg L−1, kompletterat med 30 g L−1 sackaros och 8 g L−1 agar under 16/8 h ljus/mörker fotoperiod.

• För acklimatisering:

• Efter 4 veckor, Ta försiktigt ut de välväxta rotade plantorna (8–9 cm höga) från odlingskärlen och skölj noga med rinnande kranvatten.
• Sedan, skölj rötterna med vatten för att ta bort agarmediet.
• Förvara plantorna i odlingsrummet med en temperatur på 25 ± 2 °C i 5 dagar innan de överförs till växthuset.
• Efter fem dagar, plantera plantorna i en liten plastkruka storlek 20 × 15 cm som innehåller ett jordmedium med en kombination av matjord och torvmossa i förhållandet 1:2.

Fortsätt att titta på din växt och registrera deras tillväxt och märk eventuella negativa förändringar för att vidta omedelbara åtgärder innan dina kulturer är helt bortskämda.

Och, om detta protokoll fungerar för dig, låt oss veta på [email protected].

För eventuella vävnadsodlingskrav, besök PCT-butiken nu och få allt du vill komma igång med dina vävnadsodlingsprocesser.

Och, om du behöver några förslag och lösningar på dina vävnadsodlingsproblem, du kan använda våra konsulttjänster för att direkt prata med våra forskare.